五条蚋ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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通过正交试验及单因素试验对五条蚋S.quinquestriatumISSH。PCR反应体系中的引物、DNA模板、dNTP、Mg2+、BSA、TaqDNA聚合酶浓度6个关键因素进行优化,建立五条蚋ISSR最适反应体系:20μl反应体系中引物1.0μmol/L、DNA模板50.0ng/v.1、dNTP0.15mmol/L、Mg2+1.50mmol/L、BSA2.00mg/ml、TaqDNA聚合酶0.155U/μl。通过对24条备选引物进行温度梯度筛选,获得8条能够稳定扩增且多态性较好的引物。为今后利用ISSR
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