PCR快速检测细菌16S rRNA基因的初步研究

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目的 :建立检测细菌 16 S r RNA基因的 PCR方法。方法 :以细菌 16 S r RNA基因为靶序列 ,利用计算机软件 primer5 .0 ,Bioedit设计 2条引物 -pm1,pm 2并建立相应的 PCR方法。采用该 PCR方法扩增实验室保留菌株的 16 S r RNA基因 ;以人类外周血白细胞基因组 DNA、HBV-DNA阳性血清以及白色念珠菌为对照 ,检测该实验方法的特异性 ;采用倍比稀释的方法进行该实验方法的敏感性实验。结果 :用引物 pm 1,pm2对 17个不同菌株进行 PCR扩增 ,均得到 371bp左右长度的 DNA片段 ,特异性实验表明 ,此通用引物与人类基因组 DNA、真菌及病毒无交叉反应。敏感性实验表明 ,用 pm1,pm 2引物进行的 PCR扩增可检测出 2 0 CFU /ml。结论 :16 S r RNA基因 PCR检测方法具有特异、敏感、快速的特点。
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