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应用核酸杂交技术检测外周血单个核细胞中HBV-DNA
【机 构】
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湖北省黄石市传染病医院
【出 处】
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中华微生物学和免疫学杂志
【发表日期】
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1991年11期
其他文献
本文报道了用分子杂交技术检测基因工程制品人白细胞介素2（rhIL-2）中外源DNA的方法。提取、纯化rhIL-2工程菌的总DNA，超声波裂解的DNA片段用生物素标记后作为探针，检测rhIL-2制品中的DNA含量。被检测样品点在硝酸纤维膜上后，用蛋白酶K溶液对该膜进行处理，消除了使用生物素标记的DNA探针所常出现的假阳性影响。该法重复性好，操作方便，灵敏度高，可检测出1pg的DNA。用该方法对卫生部
用VeroE-6细胞从贵州省流行性出血热（EHF）病人和鼠中分离到EHF病毒33株，能在乳小白鼠脑内稳定传代的28株中，27株出现有规律的发病和死亡，其发病时间、代次和毒力不同，1株病毒已传22代，仍未发病，有可能用于活疫苗的研究；病毒在感染的乳小白鼠体内分布广泛，以肺、脑组织为多，接种后4天到至少50天都检测到病毒抗原，12天后同时在血中查到IgG抗体；同一病毒株经不同途径（脑内、皮下、口腔）或
我们建立了一种简便、特异、敏感的登革病毒RNA逆转录及用Taq DNA聚合酶对其cDNA进行扩增的方法。采用的两个引物分别与登革病毒NS1基因的意义股和反意股互补，它们首尾之间的距离约为539核苷酸。与两引物相对应的NS1基因的序列在4个血清型的登革病毒中具有很高的保守性。被感染的C6/36细胞培养上清中的登革2型病毒与其特异抗体结合，经含Triton X-100的裂解缓冲液处理，释放出病毒RNA
用已知抗EHF病毒核衣壳蛋白（NP）的单克隆抗体A35偶联于Sepharose 4B免疫吸附柱进行亲和层析，纯化EHF病毒抗原（Chen、A9、R22株），经高压液相色谱（HPLC）进一步纯化。HPLC纯化样品用不同特性的单克隆抗体、EHF患者血清及正常人血清，通过ELISA间接法鉴定证实为EHF病毒特异性的；经SDSPAGE测定其分子量为50kD。但不同毒株的NP特性并不完全一致，A9-NP具有
在组建成功人白细胞介素4（hIL-4）表达质粒pBV220/hIL-4基础上，应用多聚酶链式反应（PCR）技术，我们构建成hIL-4高效表达克隆，命名为pBV220/hIL-4a。核苷酸序列分析证明该质粒去除了IL-4终止密码子TGA后200bp3′末端侧翼区核苷酸，且以定位突变技术改原终止密码TGA为原核系统强终止密码子TAA。新构建的表达质粒经SDS-PAGE及密度扫描分析结果表明：表达hIL
本文对登革2型04株病毒结构蛋白基因的核苷酸及氨基酸序列进行了分析。结果表明D2-04株结构蛋白基因含2325个核苷酸，编码3个结构蛋白：衣壳蛋白（C）、膜蛋白前体（prM）、膜蛋白（M）和包膜蛋白（E），氨基酸总数为775。蛋白C、prM（M）和E基因的核苷酸数分别为342、273、225和1485。其相应的氨基酸数分别为114，91，75和495。通过序列分析比较，发现包膜蛋白E最为保守，有3