不同荧光定量PCR分析方法检测大鼠脑缺血再灌注损伤中Caspase-3基因的表达研究

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目的:应用实时荧光PCR检测大鼠脑缺血/再灌注损伤组织中的Caspase-3基因表达变化,并比较了相对定量与绝对定量分析方法的技术优劣。方法:相对定量实验中,以β—actin基因作为内参,采用Delta—delta Ct法计算目的基因表达变化。而在绝对定量实验中,构建了含Caspase-3基因的重组质粒,以该重组质粒作标准品,构建标准曲线并计算样品组中Caspase-3基因拷贝数。结果:相对定量数据表明相对于假手术组,Caspase-3基因在模型组中的表达上调了7.52倍,而在治疗组1和2中分别上调了4.
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