目的:为制备糖类抗原19-9(Carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)特异性单克隆抗体。方法:以免疫后小鼠血清效价及其IC50值确定融合用小鼠,融合、筛选获得阳性杂交瘤细胞株。制备、收集并纯化腹水抗体,紫外分光光度法测定抗体浓度;辣根过氧化物酶标记抗体后,筛选配对抗体建立DAS-ELISA检测方法,并与国外检测试剂盒进行对比验证检测性能。结果:细胞融合后获得3株单抗细胞株(ZJY1-2C8、ZJY2-7F10、ZJY3-1G9),筛选确定ZJY3-1G9作为包被抗体、ZJY2-7F10作为酶标抗体,成功建立DAS-ELISA检测方法,最低检测限为26.4 U/ml。线性范围为30~300 U/ml。通过检测病患血清33份,证实与国外试剂盒检测的相关系数r=0.950 4。结论:所制备的单抗可用于CA19-9试剂盒的研制。