粉尘螨Ⅰ类变应原（Der fⅠ）的克隆表达、纯化及免疫学特性

来源 :昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jingjing2011

【摘要】

：

粉尘螨Ⅰ类变应原（DerfⅠ）是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原，可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨，提取总RNA，采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段，产物连接入T载

【作者】

：

朱健琦刘志刚高波吉坤美邢苗

【机构】

：

深圳大学生命科学学院,深圳市微生物基因工程重点实验室

【出处】

：

昆虫学报

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

粉尘螨变应原表达纯化特性鉴定 Dermatophagoides farinae allergen expression purification

【基金项目】

：

国家“863”计划（2002AA214011）,国家自然科学基金项目（30471505,30271226）,广东省科技重大专项（2003A3080502）,深圳市科技计划项目

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粉尘螨Ⅰ类变应原（DerfⅠ）是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原，可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨，提取总RNA，采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段，产物连接入T载体（pMDl8）。经扩增后，用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上，得到重组质粒pET24a-Der fⅠ，工程菌经IPTG诱导培养，高效表达出Der fⅠ蛋白，该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化，用Western blot及ELISA方法检测免疫学活

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