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目的
研究神经介素B(NeuroB)对成年大鼠心室肌细胞L型钙离子通道的调节及信号转导机制。
方法应用RT-PCR及Western blot方法研究NeuroB受体mRNA及蛋白在成年大鼠心室肌细胞中的表达。应用ELISA方法检测NeuroB对心室肌细胞中cAMP含量的影响。应用全细胞膜片钳技术研究NeuroB对成年大鼠心室肌细胞L型钙离子通道电流(IL)的作用,并应用药理学方法阐明其信号转导机制。
结果NeuroB受体在成年大鼠心室肌细胞中呈高表达。NeuroB对大鼠心室肌细胞IL具有量效依赖性的增加作用。蛋白激酶A(PKA)阻断剂KT-5720能够抑制NeuroB对该IL的增强作用,但蛋白激酶C(PKC)阻断剂GF109203X却无任何效应。NeuroB可浓度依赖性增加心室肌细胞中cAMP含量水平。
结论NeuroB对成年大鼠心室肌细胞IL具有剂量依赖性的增强作用,该作用是通过NeuroB受体激活及下游PKA激酶途径起效。