探讨胆酸对Apcmin/＋小鼠肠道腺瘤癌变的影响及其作用机制。
方法将20只Apcmin/＋小鼠分为对照组和胆酸组，每组10只。对照组常规饮食，胆酸组在常规饮食基础上添加0.4%胆酸。给药12周后处死，观察两组肠道肿瘤数目、大小和分布情况。HE染色评价肠道肿瘤病理类型，Ki-67免疫组织化学法评价肿瘤细胞增殖水平。实时荧光定量PCR检测肠道炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平。通过免疫组织化学法评价胆酸对IL-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)通路的激活情况。蛋白质印迹法进一步验证胆酸刺激对IL-6/STAT3及其下游靶基因细胞周期蛋白的影响。统计学分析采用独立样本t检验。
结果与对照组相比，胆酸可显著增加Apcmin/＋小鼠肠道腺瘤数量[(22.80±0.93)个比(33.40 ±1.17 )个]和Ki-67阳性细胞率[(31.60±2.14)%比(71.20±3.19)%]，差异均有统计学意义(t＝7.11、10.31，P均<0.01)。胆酸组HE染色未见明显炎性细胞浸润，炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α相对表达量均高于对照组(分别为7.09±1.03比1.09±0.11，2.27±0.19比0.99±0.09，14.70±2.29比1.13±0.10)，差异均有统计学意义(t＝5.81、6.11、5.92，P均<0.01)。在小鼠肠道组织中胆酸可明显上调IL-6和磷酸化的STAT3(Tyr705)的蛋白质表达水平，胆酸刺激永生化结肠上皮细胞系(IMCE)组磷酸化的STAT3(Tyr705)表达水平约是对照组的5倍(5 517.00±81.50比863.50±9.13)，细胞周期蛋白表达水平约是对照组的7倍(11 165.00±78.53比2 443.00±45.85)，差异均有统计学意义(t＝56.74、95.91，P均<0.01)。
结论胆酸可通过诱导肠道低度炎性反应激活IL-6/STAT3通路，促进肿瘤细胞增殖从而诱导Apcmin/＋小鼠肠腺瘤癌变。