【摘 要】
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旨在利用原核表达系统制备可溶性的PD-1胞外段（以下简称exPD-1）蛋白.以C57BL/6小鼠脾细胞cDNA为模板,扩增小鼠exPD-1基因,成功构建重组质粒pET-28a-exPD-1,并在E.coli BL21（DE3）
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旨在利用原核表达系统制备可溶性的PD-1胞外段（以下简称exPD-1）蛋白.以C57BL/6小鼠脾细胞cDNA为模板,扩增小鼠exPD-1基因,成功构建重组质粒pET-28a-exPD-1,并在E.coli BL21（DE3）中诱导表达.结果显示,小鼠exPD-1重组蛋白大小约为17 kD,以包涵体形式存在.exPD-1包涵体蛋白经8 mol/L尿素变性、Ni-NTA亲和层析后,采用尿素梯度透析法对蛋白进行复性,复性效果不佳,添加氧化/还原型谷胱甘肽复性后,复性率达到50%以上,提高了复性效率.小鼠exP
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