目的：研究欧矢车菊（Centaurea Behen L．）根不同极性萃取物的体外抗氧化活性，并通过紫外分光光度法测量其中总黄酮含量，建立了欧矢车菊根总黄酮的最佳微乳薄层条件。方法采用1，1-二苯代苦味酰基（DPPH）自由基清除法、清除超氧阴离子（O－2·）自由基法、ABTS 自由基清除法和铁离子还原能力测定法，测定欧矢车菊根不同极性萃取物的体外抗氧化活性，并与阳性对照进行比较与评价。同时采用紫外分光光度法，以芦丁为对照品，测定有效部位的总黄酮含量；以十二烷基硫酸钠（SDS）、正丁醇、正庚烷，水微乳液等作为展开剂，通过聚酰胺薄层层析，定性分析欧矢车菊根药材中总黄酮类成分，应用均匀设计，以色谱分离函数 COF 为统计指标，考察了微乳配比因素对分离效果的影响。结果不同极性萃取部位对 DPPH 和 ABTS 自由基均有清除能力并呈明显的量效关系，其中乙酸乙酯部位的清除能力最强，接近于对照品维生素 C；欧矢车菊根不同极性部位都对超氧阴离子（O－2·）具有较弱的除能力；以上不同极性萃取部位均有 Fe3＋还原能力，除乙酸乙酯部位，其余4个部位的还原能力没有太大差异，当浓度达1 mg／mL 时，乙酸乙酯萃取部位的还原能力接近于同浓度下维生素 C 的还原能力。结论欧矢车菊根药材不同极性萃取部位均具有一定的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位抗氧化能力最显著，而且乙酸乙酯部位中总黄酮含量为最高。筛选出十二烷基硫酸钠（SDS）：正丁醇＝33：57，含水量75％（O／W 型）微乳液为适宜的展开剂。本研究为欧矢车菊根有效成分的深入研究提供理论依据。