【摘 要】
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目的制备人肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3(TIPE3)的特异性抗体,分析将其用于Western blotting和免疫组化检测TIPE3蛋白表达的可行性和特异性。方法利用人TIPE3抗原制备兔
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目的制备人肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样蛋白3(TIPE3)的特异性抗体,分析将其用于Western blotting和免疫组化检测TIPE3蛋白表达的可行性和特异性。方法利用人TIPE3抗原制备兔抗人TIPE3多克隆抗体;构建人TIPE3真核表达载体;采用Western blotting方法检测抗体的特异性、TIPE3在肿瘤细胞系中的表达并用免疫组化方法检测人TIPE3蛋白在组织中的表达。结果制备的兔抗人TIPE3多克隆抗体的滴度为1∶400,该抗体可特异性地检测细胞中的TIPE3蛋白,与TIPE2无交叉反应;发现人肺腺癌细胞系H1975、肝癌细胞系HepG2高表达TIPE3,但其在宫颈癌细胞系Hela低表达;用于免疫组织化学检测,可检测到TIPE3在肺癌组织中高表达于细胞浆和细胞膜,在癌旁组织和正常肺组织未见表达。结论成功制备了人TIPE3多克隆抗体,特异性高,可用于TIPE3的Western blotting和免疫组化检测。
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