论文部分内容阅读
目的 克隆、表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)自噬相关蛋白3(TgAtg3)基因,并制备能特异性识别该蛋白的多克隆抗体。 方法 以弓形虫RH株cDNA为模板,构建pET28a-TgAtg3重组质粒,转化入大肠埃希菌(E. coli)Rosetta感受态细胞,经自诱导培养基诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定。以纯化的TgAtg3蛋白作为抗原皮下多点注射免疫日本大耳白兔,125 μg/(只&