【摘 要】
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目的:考察香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制,为香附的临床应用提供实验依据。方法:通过噻唑蓝（MTT）比色法考察不同质量浓度香附烯酮对Caco-2细胞的毒性,以确定转运试验的
【机 构】
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江西中医药大学; 江西中医药高等专科学校;
【基金项目】
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江西省科技厅项目(20161BBG70072);江西省高校落地计划产学研项目(KJLD14057);江西省教育厅科技项目(170721)
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目的:考察香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运机制,为香附的临床应用提供实验依据。方法:通过噻唑蓝（MTT）比色法考察不同质量浓度香附烯酮对Caco-2细胞的毒性,以确定转运试验的给药浓度。以香附烯酮表观渗透系数(Papp)和累积转运量为评价指标,采用液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）测定香附烯酮的含量,色谱条件为流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0～1.5 min,35%A;1.5～2 min,35%～90%A;2～4 min,90%A;4～4.1 min,90%～35%A;4.1～8 min,35%A）,流速0.3 m L·min-1,进样量1μL,柱温30℃;质谱条件为电喷雾离子源（ESI）,正离子模式,香附烯酮及内标物蛇床子素的检测离子分别为m/z 219.2～110.9,m/z 245.0～189.0。探讨了香附烯酮质量浓度、给药时间、乙二胺四乙酸（EDTA）及P-糖蛋白（P-gp）抑制剂对香附烯酮在体外细胞模型上跨膜转运的影响。结果:香附烯酮质量浓度处于3～90 mg·L-1时,孵育4 h内对Caco-2细胞没有明显毒性。香附烯酮在Caco-2细胞模型中的转运存在一定的浓度及时间依赖性,其Papp>1×10-6cm·s-1,说明药物吸收良好,外排率处于0.5～1.5;加入细胞旁路转运抑制剂EDTA及P-gp转运体抑制剂维拉帕米后,双向Papp没有显著性差异。结论:香附烯酮在Caco-2细胞模型转运机制主要是被动扩散,细胞旁路转运及P-gp不参与其转运。
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