pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系HepG2中的表达

来源 :肝脏 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ZHAOTAON

【摘要】

：

目的构建pEGFP-prohibitin真核表达质粒,并鉴定其在pEGFP-prohibitin转染的人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法采用高保真PCR扩增获得prohibitin的全长编码序列,构建真核表达载

【作者】

：

翟嵩孙明珠王文俊李亚萍张欣李梅党双锁

【机构】

：

西安交通大学医学院第二附属医院感染科

【出处】

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肝脏

【发表日期】

：

2016年1期

【关键词】

：

prohibitin蛋白基因表达重组质粒转染

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目的构建pEGFP-prohibitin真核表达质粒,并鉴定其在pEGFP-prohibitin转染的人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法采用高保真PCR扩增获得prohibitin的全长编码序列,构建真核表达载体pEGFP-prohibitin,并通过基因测序和BLAST比对鉴定重组质粒;提取pEGFP-prohibitin和pEGFP-N1质粒,并通过TurboFect转染试剂转染HepG2细胞;采用实时PCR和Western印迹方法分别在mRNA水平和蛋白质水平检测prohibitin蛋白在转染后H

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