【摘 要】
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目的 探究Grb2相关结合蛋白1(Gab1)表达在胃癌中的临床意义和通过PI3K/AKT通路调控转移的机制.方法 收集2015年3月至2018年3月胃癌组织和癌旁组织标本各70份,通过免疫组织化学染色检测Gab1表达水平,并分析Gab1表达水平与患者一般资料和病理特点的相关性.将胃腺癌细胞AGS分为空白组、对照组、Gab1组和Gab1+LY294002组,Gab1组通过转染pCMV6-entry-Gab1重组质粒过表达Gab1,对照组转染阴性对照质粒.Gab1+LY294002组培养基中加入PI3K/AK
【机 构】
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陆军军医大学第一附属医院健康管理中心,重庆 400038
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目的 探究Grb2相关结合蛋白1(Gab1)表达在胃癌中的临床意义和通过PI3K/AKT通路调控转移的机制.方法 收集2015年3月至2018年3月胃癌组织和癌旁组织标本各70份,通过免疫组织化学染色检测Gab1表达水平,并分析Gab1表达水平与患者一般资料和病理特点的相关性.将胃腺癌细胞AGS分为空白组、对照组、Gab1组和Gab1+LY294002组,Gab1组通过转染pCMV6-entry-Gab1重组质粒过表达Gab1,对照组转染阴性对照质粒.Gab1+LY294002组培养基中加入PI3K/AKT抑制剂LY294002(5μmol/L).使用qPCR检测Gab1 mRNA相对表达水平,通过Western blot检测Gab1、p-AKT和AKT蛋白水平.分别通过CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞增殖、迁移、侵袭能力.结果 Gab1在癌旁组织中表达水平较低,在胃癌组织中的表达水平较高.存在淋巴转移、存在远端转移、T3+T4浸润深度、Ⅲ～Ⅳ期患者较无淋巴转移、无远端转移、T1+T2浸润深度、Ⅰ～Ⅱ期患者Gab1高表达水平所占比例更高(P<0.05).Gab1组和Gab1+LY294002组细胞中Gab1 mRNA相对表达水平和蛋白表达水平均明显高于空白组和对照组(P<0.05).LY294002对Gab1 mRNA和蛋白表达影响不明显.Gab1组细胞活力、迁移和侵袭能力明显高于空白组、对照组和Gab1+LY294002组(P<0.05),并且Gab1组的AKT磷酸化水平明显高于空白组、对照组和Gab1+LY294002组(P<0.05).结论 Gab1在胃癌组织中高表达,并且高表达水平的Gab1与胃癌的恶性表型有关.上调的Gab1表达会通过激活PI3K/AKT通路促进胃癌细胞的细胞迁移和侵袭.
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