【摘 要】
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根据GenBank中流产布氏杆菌BPE123基因序列（登录号:NC006933.1）,设计引物,以布氏杆菌病疫苗菌A19全基因组DNA为模板扩增BPE123基因,将目的基因克隆入pEASY-T3载体,测序正确后,
【机 构】
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宁夏大学农学院; 山东省农业科学院奶牛研究中心; 中国兽医药品监察所;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863)项目(2012AA101300)
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根据GenBank中流产布氏杆菌BPE123基因序列（登录号:NC006933.1）,设计引物,以布氏杆菌病疫苗菌A19全基因组DNA为模板扩增BPE123基因,将目的基因克隆入pEASY-T3载体,测序正确后,双酶切pEASY-T3-BPE123,目的片段BPE123连入pET-32a（+）表达载体,构建表达质粒pET-32a（+）-BPE123,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达;对BPE123基因进行生物信息学分析。结果显示,成功构建了重组菌pET-32a（+）-BPE123-BL21（DE3）,诱导表达了融合蛋白BPE123。生物信息学分析显示,BPE123基因N端25个氨基酸是其信号肽,与其相互作用的蛋白大都与菌毛相关,它们是flgF、fliI、motA、BruAb20155、BruAb20121和BruAb20125。布氏杆菌属内BPE123基因序列的同源性高达99%。本研究获得了BPE123蛋白并预测了BPE123基因的相关生物学功能,为进一步探索该蛋白的免疫原性和在布氏杆菌胞内寄生过程中的作用奠定了基础。
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