目的 探明Fas／Fas配体（FasL）系统及其主导信号转导通路在酒精性肝炎和肝纤维化发生、发展中的作用及其机制。方法C57BL／6J小鼠以含4％（V／叨乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养4周，自第5周起联合微量cck腹腔注射至第8周，分别建立酒精性肝炎和肝纤维化模型。脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测肝细胞凋亡。分别采用逆转录一聚合酶链反应、Westernblot及免疫组织化学染色检测肝组织Fas、FasL、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）及细胞色素P4502El（CYP2E1）的mRNA及蛋白质表达。多组样本均数间差异比较用单因素方差分析或Kmskal-WallisH检验，组间比较用LSD—f检验或Mann-WhitneyU检验。结果应用含4％（V／叻乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料联合微量cch腹腔注射可快速建立小鼠酒精性肝炎和肝纤维化模型。肝细胞凋亡数随肝脏炎症及纤维化的加重而增高，并伴有凋亡相关基因表达增强。对照组、酒精性肝炎组、酒精性肝纤维化组小鼠细胞凋亡相关基因表达水平依次升高：FasmRNA的相对表达量分别为0．50±0．05、0．61±0．10、0．76±0．03（H=12．137P〈0．05），Fas蛋白的相对表达量分别为0．52±0．14、0．86±0．10、0．99±0．09（F=12．758P〈0．01）；FasLmRNA相对表达量分别为0．31±0．03、0．53±0．02、1．02土0．04（F=153．260P〈0．01）；caspase3mRNA对表达量分别为0．86±0．11、0．85±0．05、1．33士0．16∽=8．740，P〈0．01），caspase3蛋白相对表达量分别为0．40±0．03、0．69±0．06、1．02±0．10（F=90．785，P〈0．01）；CYP2ElmRNA相对表达量分别为0．72±0．14、1．00±0．15、1．30±0．20（F=4．713，P〈0．01）；各组问比较，尸值均〈0．05。免疫组织化学染色结果显示，FasL及CYP2El的蛋白与mRNA的表达趋势一致。结论Fas／FasL系统及其下游信号转导通路的激活可能是酒精性肝病中诱导肝细胞凋亡的主导因素，可进一步促进酒精性肝炎和肝纤维化的发生与进展。
Fas／Fas酉己体系统及其下游信号转导通路的激活促进酒精性肝炎及酒精性肝纤维化的进展
【摘 要】
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目的 探明Fas／Fas配体（FasL）系统及其主导信号转导通路在酒精性肝炎和肝纤维化发生、发展中的作用及其机制。方法C57BL／6J小鼠以含4％（V／叨乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养4周，自第5周起联合微量cck腹腔注射至第8周，分别建立酒精性肝炎和肝纤维化模型。脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测肝细胞凋亡。分别采用逆转录一聚合酶链反应、Western
【机 构】
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河北医科大学第三医院中西医结合肝病科,石家庄050051,河北医科大学第三医院中西医结合肝病科,石家庄050051,河北医科大学第三医院中西医结合肝病科,石家庄050051,河北医科大学第三医院中西医
【出 处】
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中华肝脏病杂志
【发表日期】
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2013年21期
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