【摘 要】
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采用激光镊子拉曼光谱(LTRS)分析大肠杆菌(Escherichia.coli)表达蚕豆(Vicia faba L.)14-3-3b可溶性蛋白(Soluble protein)与包涵体蛋白(Inclusionbody protein)的结构差异以
【机 构】
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昆明理工大学生物工程技术研究中心,广西科学院生物物理实验室
【基金项目】
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国家自然基金资助项目(No.31260063)资助
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采用激光镊子拉曼光谱(LTRS)分析大肠杆菌(Escherichia.coli)表达蚕豆(Vicia faba L.)14-3-3b可溶性蛋白(Soluble protein)与包涵体蛋白(Inclusionbody protein)的结构差异以及两种蛋白在不同温度下在重组菌中的表达水平。结果表明,14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白有明显不同的拉曼光谱特征峰,说明LTRS技术可以鉴定14-3-3b的可溶性蛋白和包涵体蛋白。14-3-3b可溶性蛋白特征峰1002,1451和1665 cm!1在16℃下诱导的重组菌中明显增强,在28℃下诱导的重组菌中明显减弱,而反映14-3-3b包涵体蛋白的特征峰900和1446 cm!1在16℃下诱导的重组菌中明显减弱,在28℃下诱导的重组菌中明显增强,这几个峰强的变化反映14-3-3b可溶性蛋白与包涵体蛋白在大肠杆菌细胞中表达水平的变化和SDS-PAGE电泳分析的结果一致。说明LTRS是检测单个大肠杆菌细胞中可溶性重组蛋白和包涵体蛋白表达水平的一种快速有效的方法。
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