探讨携带HPV11基因组的HaCaT细胞(HPV11.HaCaT)中载脂蛋白B信使RNA编辑酶催化多肽样蛋白3家族(APOBEC3s,A3s)mRNA表达、主要A3蛋白在细胞内的表达、分布,以及外源性α干扰素对其调节。
方法qRT-PCR检测HPV11.HaCaT细胞中A3A、A3B、A3C和A3H mRNA的基础表达水平,并与正常HaCaT细胞作比较;分别用不同浓度的重组人IFN-α2b(rhIFN-α2b)作用于HaCaT、HPV11.HaCaT、Hela细胞6、24、48 h后,qRT-PCR检测A3A、A3B、A3C和A3H mRNA表达水平。细胞免疫荧光染色法观察rhIFN-α2b刺激6 h时,A3A蛋白在3种细胞中的表达和分布情况。
结果HPV11.HaCaT细胞内A3A、A3B、A3C mRNA表达量均明显高于正常HaCaT细胞(P < 0.05)。在不同浓度rhIFN-α2b刺激下,3种细胞4种A3成员mRNA表达趋势存在差异,其中A3A升高最为明显。与各自正常对照组相比,106 IU/ml rhIFN-α2b刺激6 h时3种细胞的A3A mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(HaCaT细胞35.77 ± 5.01比1.00 ± 0.05,P < 0.05;HPV11.HaCaT细胞15.34 ± 2.14比0.99 ± 0.01,P < 0.05;Hela 24.60 ± 5.45比0.97±0.03,P < 0.05),而A3B、A3C和A3H mRNA相对表达量均低于10倍。经106 IU/ml rhIFN-α2b处理6 h后,3种细胞胞质和胞核中均可见到A3A蛋白的阳性染色增加。
结论HPV11进入HaCaT细胞后,可激活A3s(尤其是A3A)免疫系统。α干扰素诱导A3A的高表达可能是其发挥免疫调控功能的机制之一。