目的 观察1α,25-二羟维生素D3(简称VitD3)抑制白介素1β (IL-1β)和干扰素γ(IFN-γ)诱导胰岛β细胞凋亡的作用及对胰岛素分泌功能的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将VitD3和IL-1β/IFN-γ作用于细胞后,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞的生长增殖率、赫斯特荧光染色观察细胞凋亡形态变化、磷脂结合蛋白V/碘化丙啶双染色流式检测细胞凋亡率、酶联免疫分析检测葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS).结果 IL-1 β/IFN-γ组细胞生长增殖率为32.0%±2.7%,不同浓度VitD3( 10 -10、10-9、10-8mol/L)+IL-1β/IFN-γ组细胞生长增殖率分别为54.0%±3.2%、59.0%±1.5%,73.0%±2.1%,与IL-1β/IFN-γ组比较差异均有统计学意义(均P<0.01);IL-1β/IFNl+VitD3( 10-8 mol/L)组细胞的凋亡率为39.7%,与IL-1β/IFN-γ组(68.4%)比较差异有统计学意义(P<0.01);IL-1β/IFN-γ+VitD3( 10-8 mol/L)+维生素D受体-小分子干扰核苷酸(VDR-SiRNA)组细胞的凋亡率为64.3%,与IL-1β/IFN-γ+ VitD3( 10-8 mol/L)组比较差异有统计学意义(P<0.01).用15 mmol/L葡萄糖标准碳酸氢盐缓冲液溶液刺激时,IL-1β/IFN-γ+VitD3组GSIS明显恢复(7.34±0.21) ng/ml,与IL-1β/IFN-γ组(4.88±0.32) ng/ml比较差异有统计学意义(P<0.01);而IL-1β/IFN-γ+ VitD3+ VDR-SiRNA组GSIS明显降低(3.73±0.43) ng/ml,与IL-1β/IFN-γ组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 VitD3可以抑制细胞因子诱导的胰岛β细胞凋亡和恢复受损β细胞的胰岛素分泌功能,在β细胞上VitD3可能主要是通过与维生素受体结合而发挥作用的。
1α,25-二羟维生素D3对胰岛β细胞的保护作用及其机制探讨
【摘 要】
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目的 观察1α,25-二羟维生素D3(简称VitD3)抑制白介素1β (IL-1β)和干扰素γ(IFN-γ)诱导胰岛β细胞凋亡的作用及对胰岛素分泌功能的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将VitD3和IL-1β/IFN-γ作用于细胞后,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞的生长增殖率、赫斯特荧光染色观察细胞凋亡形态变化、磷脂结合蛋白V/碘化丙啶双染色流式检测细胞凋亡率、酶联免疫分析检测葡萄糖刺激胰岛素
【机 构】
:
410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科中南大学糖尿病中心中南大学代谢内分泌研究所糖尿病免疫学教育部重点实验室,410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科中南大学糖尿病中心中南大学代谢内分泌研究
【出 处】
:
中华医学杂志
【发表日期】
:
2012年92期
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