p25表达诱发肾小球足细胞凋亡

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目的通过在肾小球足细胞中p25基因表达,研究p25对足细胞结构及功能的影响。方法将分化成熟的小鼠足细胞(以下简称足细胞)在10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中常规培养10 d后,分为对照组(正常足细胞)、p25组(p25基因转染的足细胞)和EV组(空载体转染的足细胞);采用Western blot方法测定p25及细胞凋亡标志蛋白Cleaved caspase3的表达水平,了解细胞凋亡情况;应用免疫组化方法观察足细胞内actin的排列,以了解细胞结构的变化。结果在正常肾小球足细胞只有p35的表达,没有p25表达;在p25基因转染的足细胞(p25组)中有丰富的p25的表达,对照组和EV组均无p25表达;p25组的Cdk5活性和细胞凋亡标志蛋白Cleaved caspase3表达均高于对照组和EV组(P<0.05)。与正常对照组和EV组比较,p25组足细胞形态发生改变,足细胞内Beta-actin的排列紊乱。结论在正常分化成熟的离体足细胞没有p25的表达,p25表达可引起足细胞形态改变,细胞内Actin蛋白排列紊乱,诱发细胞凋亡。
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