利用定点突变改变树干毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖醇脱氢酶辅酶特性的研究

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在酿酒酵母中同时表达木糖还原酶基因(xyl1)和木糖醇脱氢酶基因(xyl2)可使酿酒酵母利用木糖发酵生成乙醇。但由于两种酶所依赖的辅酶不同导致酿酒酵母细胞内氧化还原失衡,致使中间产物大量积累,降低了乙醇产率。本研究从树干毕赤酵母中克隆了木糖醇脱氢酶基因,通过与银叶粉虱山梨醇脱氢酶[其活性依赖NADP+(H)]序列进行对比,确定突变位点,并利用融合PCR的方法进行定点突变。结果表明,突变体对辅酶NADP+(H)的亲和力有不同程度的提高,其中三点突变体的辅酶特性得到明显改变。本研究为构建高效利用木糖发酵生成乙
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