【摘 要】
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目的：基于自噬-凋亡互作蛋白Beclin 1，探究康艾注射液逆转人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制。方法：（1）应用Kaplan-Meier Plotter在线工具分析Beclin 1与肺癌患者生存期的关系。（2）CCK-8法检测顺铂、康艾及康艾联合顺铂对A549（顺铂敏感的亲本细胞）和A549/DDP（顺铂耐药细胞）细胞增殖活性的影响。（3）Western blot法检测自噬相关蛋
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81973735,82174254）；
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目的：基于自噬-凋亡互作蛋白Beclin 1，探究康艾注射液逆转人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制。方法：（1）应用Kaplan-Meier Plotter在线工具分析Beclin 1与肺癌患者生存期的关系。（2）CCK-8法检测顺铂、康艾及康艾联合顺铂对A549（顺铂敏感的亲本细胞）和A549/DDP（顺铂耐药细胞）细胞增殖活性的影响。（3）Western blot法检测自噬相关蛋白（Beclin 1、ATG7、LC3）和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3）的表达水平。结果：（1）应用Kaplan-Meier Plotter在线工具对BECN1 mRNA表达水平和临床病理学指标分析显示，BECN1高表达组生存期显著高于BECN1低表达组，肺腺癌组织BECN1表达水平与患者预后呈显著正相关（P＜0.001）。（2）A549/DDP细胞的Beclin 1蛋白表达量比A549细胞高（P＜0.05）。（3）与对照组比较，顺铂上调了A549和A549/DDP细胞的Beclin 1、ATG7、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ表达（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。在A549细胞中，顺铂干预后Bax、cleaved caspase-3表达增加（P＜0.01,P＜0.001）,Bcl-2表达下降（P＜0.01），且Bax/Bcl-2比值上调（P＜0.01）；在A549/DDP细胞中，顺铂干预后Bax、Bcl-2表达增加（P＜0.05,P＜0.01），但Bax/Bcl-2比值下降（P＜0.05）。（4）与顺铂组比较，低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均能显著抑制A549/DDP细胞增殖活性（P＜0.01,P＜0.001），顺铂+低浓度康艾组Beclin 1表达降低（P＜0.001），顺铂+中、高浓度康艾组Beclin 1表达增加（P＜0.001），且顺铂+高浓度康艾组表达增加量最多（P＜0.001）。（5）与顺铂组比较，低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均可上调ATG7（P＜0.05,P＜0.01）、LC3Ⅰ（P＜0.01,P＜0.001）、LC3Ⅱ（P＜0.01,P＜0.001）表达水平，且与康艾注射液的浓度升高呈正相关。Bax表达在顺铂+康艾低浓度组中降低（P＜0.05），在顺铂+康艾中、高浓度组中增加（P＜0.01）;Bcl-2表达在顺铂+康艾低、中浓度组中降低（P＜0.05），在顺铂+高浓度康艾组中增加（P＜0.05）;cleaved caspase-3表达与Bax/Bcl-2比值在顺铂+康艾低、中、高浓度组中均上调（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001），且cleaved caspase-3表达与康艾注射液浓度升高呈正相关。结论：康艾注射液能有效改善A549/DDP细胞顺铂耐药性，其机制可能为上调Beclin 1蛋白表达水平，调控Beclin1介导下的细胞自噬与凋亡互作，从而导致A549/DDP细胞自噬性死亡与凋亡。
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