【摘 要】
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目的 探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值.方法 根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应
【机 构】
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江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室,蚌埠医学院病原生物学教研室,湖南省郴州市疾病预防控制中心
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目的 探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值.方法 根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值.结果 间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6× 10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染.与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54％,漏诊率为0.8％,误诊率为0,而镜检法依次分别为53％、1.7％和3.4％.结论 复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值.
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