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【摘 要】目的：探讨胸膜炎患者结核蛋白芯片（血），胸水中结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）和结核抗体（TB-SA）检测及联合检测对结核性胸膜炎的临床诊断价值。 方法：选取于我院确诊胸膜炎患者，结核性胸膜炎患者50例，癌性胸膜炎者36例，分别选用PCR检测结核分枝杆菌DNA、酶联免疫法测定TB-SA、结核蛋白芯片系统检测血清中结核杆菌抗体，分析各检测方法的阳性率，并对各检测方法的灵敏度以及特异度进行比较。 结果：结核性胸膜炎组患者的各项检查的阳性率均显著高于癌性胸膜炎组，且各检查的阳性率均显著高于胸水涂片，差异有统计学意义，其中TB-SA联合TB-DNA以及TB-SA、TB-DNA、结核蛋白芯片三联检查均高达94.00%，显著高于胸水涂片检测。其中TB-SA+TB-DNA+结核蛋白芯片灵敏度高达94.00%，特异度25%和TB-SA+TB-DNA灵敏度高达94.00%，特异度25%，显著高于其他检查结果。 结论：结核抗体（TB-SA）、结核分枝杆菌DNA、二联检测可以有效提高结核病的诊断率，值得临床推广应用。
【关键词】结核分枝杆菌；胸膜炎；结核抗体（TB-SA）；TB-DNA；结核蛋白芯片
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）04-2694-02
肺结核是由结核分枝杆菌感染引起的，最常见的呼吸系统慢性传染病之一，主要表现为咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、不同程度的胸闷及呼吸困难，以及乏力、盗汗、午后低热、食欲减退、消瘦等全身症状，严重影响患者的生活质量[1]。研究表明，早期用药可以显著提高抗结核药的治疗疗效，因此结核患者的早期明确诊断尤其重要[2]。其中结核性胸膜炎是结核病的一大类。结核性胸膜炎患者检测，包括胸水涂片和胸水培养检查到结核杆菌是临床确诊结核性胸膜炎的主要依据，为进一步分析结核性胸膜炎患者胸水标本中结核分枝杆菌检查结果，笔者对于我院就诊的86例患者进行统计分析，并将结果报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2010年1月～2013年10月于我院确诊的86例胸膜炎患者，其中经临床证实的结核性胸膜炎患者50例，其中男29例，女21例，年龄35～69岁，平均年龄（45.3±4.5）岁；其中经病理检查证实为癌性胸膜炎者36例，均为癌导致，其中男20例，女16例，年龄35～68岁，平均年龄（46.3±5.6）岁，经比较，两组患者的年龄、性别等一般情况无显著差异，具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 聚合酶链式反应技术（PCR）检测结核分枝杆菌DNA（TB-DNA） 采用中山大学达安基因股份有限公司提供的结核分枝杆菌核酸检测试剂（PCR-荧光法），对结核分枝杆菌DNA进行分析；
1.2.2 酶联免疫测定结核抗体（TB-SA） 成都永安制药有限公司生产的结核分枝杆菌抗体（IgG）检测试剂盒， 按照说明，取病人胸水标本检测，判定患者胸水中的TB-SA；
1.2.3 结核蛋白芯片系统检测血清中结核菌蛋白 选取南京大渊生物技术工程有限公司提供的蛋白芯片检测试剂盒和阅读仪，依照说明书的操作方法，对结核蛋白芯片抗体16kD和38kD以及脂阿拉伯甘露糖（LAM）进行检测。
1.3 判定标准[3] 陽性：①DA-620仪器：在实验有效的前提下，样品Ax>N+0.6*（P1-N）判为阳性：如果N+0.6*（P1-N）≥Ax≥N+0.4*（P1-N）则属于实验灰度区，需重复实验一次，如重复试验结果Ax值≥N+0.4*（P1-N）判为阳性，否则判为阴性；如果Ax值﹤N+0.4*（P1-N）判为阴性；②结核蛋白芯片检测的6kD、38kD以及LAM中任意一项表现阳性者则判定为阳性；③用酶标仪在单波长450nm（双波长450nm/630nm）下测定各孔OD值。OD值应大于0.80
1.4 统计学方法 利用SPSS13.0软件对两组患者的检测指标进行统计分析，计数资料采用x2检验，认为P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者痰标本中结核分枝杆菌各项阳性检查结果对比
经比较，结核性胸膜炎组患者的各项检查的阳性率均显著高于癌性胸膜炎组，差异均有统计学意义（P<0.05）。对于结核性胸膜炎组各检查的阳性率均显著高于胸水涂片，差异有统计学意义，其中TB-SA联合TB-DNA以及TB-SA、TB-DNA、结核蛋白芯片三联检查均高达94.00%，显著高于胸水涂片检测（8.00%）。详情见表1。
2.2 患者痰标本中结核分枝杆菌各项检查结果的灵敏度、特异度对比 TB-SA、结核蛋白芯片、TB-DNA、TB-SA+结核蛋白芯片、TB-SA+TB-DNA、结核蛋白芯片+TB-DNA、TB-SA+TB-DNA+结核蛋白芯片的灵敏度分别为76%、28%、72%、76%、94%、76%、94%，特异度为44.44%，94.44%，63.89%、44.44%、25.00%、58.33%、25.00%。其中结核蛋白芯片的特异度较高，达94.44%，但灵敏度仅为28.00%；TB-SA+TB-DNA的灵敏度较高，达94.00%，特异度为25.00%；TB-SA+TB-DNA+结核蛋白芯片灵敏度高达94.00%，特异度达25.0%，显著高于其他检查结果。详情见表2。
3 结论
结核病是目前危及全球的慢性传染病之一，我国仅次于印度的结核病高发国家，据统计，全国约有三分之一的人口感染结核菌，并且结核病的发病率正处于逐年上升的趋势[4]。目前临床用于结核病的明确诊断的主要方法是涂片和培养，其中涂片具有操作方便、耗时短、特异性高等优点，但是涂片灵敏度仅在20%～30%，极容易漏诊[5]。培养具有灵敏度高，特异性好等优点，但培养操作要求极高，耗时长，不利于结核病患者的早期用药，影响治疗疗效[6-7]。因此，探寻方便、有效、快捷的结核病确诊方法对于结核病的早期诊断和预后都有重要意义。
【关键词】结核分枝杆菌；胸膜炎；结核抗体（TB-SA）；TB-DNA；结核蛋白芯片
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）04-2694-02
肺结核是由结核分枝杆菌感染引起的，最常见的呼吸系统慢性传染病之一，主要表现为咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、不同程度的胸闷及呼吸困难，以及乏力、盗汗、午后低热、食欲减退、消瘦等全身症状，严重影响患者的生活质量[1]。研究表明，早期用药可以显著提高抗结核药的治疗疗效，因此结核患者的早期明确诊断尤其重要[2]。其中结核性胸膜炎是结核病的一大类。结核性胸膜炎患者检测，包括胸水涂片和胸水培养检查到结核杆菌是临床确诊结核性胸膜炎的主要依据，为进一步分析结核性胸膜炎患者胸水标本中结核分枝杆菌检查结果，笔者对于我院就诊的86例患者进行统计分析，并将结果报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2010年1月～2013年10月于我院确诊的86例胸膜炎患者，其中经临床证实的结核性胸膜炎患者50例，其中男29例，女21例，年龄35～69岁，平均年龄（45.3±4.5）岁；其中经病理检查证实为癌性胸膜炎者36例，均为癌导致，其中男20例，女16例，年龄35～68岁，平均年龄（46.3±5.6）岁，经比较，两组患者的年龄、性别等一般情况无显著差异，具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 聚合酶链式反应技术（PCR）检测结核分枝杆菌DNA（TB-DNA） 采用中山大学达安基因股份有限公司提供的结核分枝杆菌核酸检测试剂（PCR-荧光法），对结核分枝杆菌DNA进行分析；
1.2.2 酶联免疫测定结核抗体（TB-SA） 成都永安制药有限公司生产的结核分枝杆菌抗体（IgG）检测试剂盒， 按照说明，取病人胸水标本检测，判定患者胸水中的TB-SA；
1.2.3 结核蛋白芯片系统检测血清中结核菌蛋白 选取南京大渊生物技术工程有限公司提供的蛋白芯片检测试剂盒和阅读仪，依照说明书的操作方法，对结核蛋白芯片抗体16kD和38kD以及脂阿拉伯甘露糖（LAM）进行检测。
1.3 判定标准[3] 陽性：①DA-620仪器：在实验有效的前提下，样品Ax>N+0.6*（P1-N）判为阳性：如果N+0.6*（P1-N）≥Ax≥N+0.4*（P1-N）则属于实验灰度区，需重复实验一次，如重复试验结果Ax值≥N+0.4*（P1-N）判为阳性，否则判为阴性；如果Ax值﹤N+0.4*（P1-N）判为阴性；②结核蛋白芯片检测的6kD、38kD以及LAM中任意一项表现阳性者则判定为阳性；③用酶标仪在单波长450nm（双波长450nm/630nm）下测定各孔OD值。OD值应大于0.80
1.4 统计学方法 利用SPSS13.0软件对两组患者的检测指标进行统计分析，计数资料采用x2检验，认为P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者痰标本中结核分枝杆菌各项阳性检查结果对比
经比较，结核性胸膜炎组患者的各项检查的阳性率均显著高于癌性胸膜炎组，差异均有统计学意义（P<0.05）。对于结核性胸膜炎组各检查的阳性率均显著高于胸水涂片，差异有统计学意义，其中TB-SA联合TB-DNA以及TB-SA、TB-DNA、结核蛋白芯片三联检查均高达94.00%，显著高于胸水涂片检测（8.00%）。详情见表1。
2.2 患者痰标本中结核分枝杆菌各项检查结果的灵敏度、特异度对比 TB-SA、结核蛋白芯片、TB-DNA、TB-SA+结核蛋白芯片、TB-SA+TB-DNA、结核蛋白芯片+TB-DNA、TB-SA+TB-DNA+结核蛋白芯片的灵敏度分别为76%、28%、72%、76%、94%、76%、94%，特异度为44.44%，94.44%，63.89%、44.44%、25.00%、58.33%、25.00%。其中结核蛋白芯片的特异度较高，达94.44%，但灵敏度仅为28.00%；TB-SA+TB-DNA的灵敏度较高，达94.00%，特异度为25.00%；TB-SA+TB-DNA+结核蛋白芯片灵敏度高达94.00%，特异度达25.0%，显著高于其他检查结果。详情见表2。
3 结论
结核病是目前危及全球的慢性传染病之一，我国仅次于印度的结核病高发国家，据统计，全国约有三分之一的人口感染结核菌，并且结核病的发病率正处于逐年上升的趋势[4]。目前临床用于结核病的明确诊断的主要方法是涂片和培养，其中涂片具有操作方便、耗时短、特异性高等优点，但是涂片灵敏度仅在20%～30%，极容易漏诊[5]。培养具有灵敏度高，特异性好等优点，但培养操作要求极高，耗时长，不利于结核病患者的早期用药，影响治疗疗效[6-7]。因此，探寻方便、有效、快捷的结核病确诊方法对于结核病的早期诊断和预后都有重要意义。