白英生物碱对叔丁基过氧化氢诱导的人神经瘤母细胞系SH-SY5Y细胞氧化应激和凋亡的作用机制研究

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目的探讨白英生物碱对叔丁基过氧化氢(tBHP)诱导的人神经瘤母细胞系SH-SY5Y细胞氧化应激和细胞凋亡的作用。方法将人神经瘤母细胞系SH-SY5Y细胞分为对照组、tBHP模型组、白英生物碱(10、20、40 mg/L)组和维生素E(100μmol/L)组。采用甲基噻唑蓝法检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态学变化,TUNEL法检测细胞凋亡,流式分析法检测线粒体膜电位(罗丹明123荧光强度)和活性氧水平[二氯荧光素(DCF)荧光强度],蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果 tBHP模型组细胞存活率和罗丹明123荧光强度明显低于对照组,细胞凋亡率和DCF荧光强度明显高于对照组;10、20、40 mg/L白英生物碱组和100μmol/L维生素E组细胞存活率和罗丹明123荧光强度明显高于tBHP模型组[(48±18)%、(61±3)%、(74±19)%、(86±35)%比(43±3)%;(60. 84±0. 11)%、(71.32±0.24)%、(79.68±0.15)%、(70.47±0. 32)%比(55.43±0. 23)%],细胞凋亡率和DCF荧光强度明显低于tBHP模型组[(31.11±0.09)%、(18.34±0.21)%、(13. 58±0. 51)%、(22. 82±0. 39)%比(37. 16±0.27)%;(62.34±0.53)%、(41.22±0.44)%、(38.57±0.65)%、(49.18±0.52)%比(75.42±0.46)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。20mg/L白英生物碱和100μmol/L维生素E能增加tBHP诱导的SH-SY5Y细胞中Bcl-2蛋白表达,同时抑制Bax蛋白表达。结论白英生物碱能够抑制SH-SY5Y细胞中活性氧产生,降低tBHP诱导的SH-SY5Y细胞的氧化应激,减少细胞凋亡。
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