肺炎克雷伯氏菌D-乳酸脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :北京化工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qq407606015

【摘要】

：

以肺炎克雷伯氏菌（Klebsiellapneumoniae）基因组DNA为模板，应用PCR技术扩增并克隆出口晋L酸脱氢酶的基因（1dhO），将其连接到表达载体pET-22b（＋）质粒上，构建pET-22b（＋）-ldhD重组质粒，测序结果

【作者】

：

宋嘉宁黄志兵刘珞谭天伟

【机构】

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北京化工大学北京市生物加工重点实验室

【出处】

：

北京化工大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2012年2期

【关键词】

：

D-乳酸 D-乳酸脱氢酶基因大肠杆菌肺炎克雷伯氏菌 D-lactate D-lactate dehydrogenase Escherichia co

【基金项目】

：

国家自然科学基金（20636010）,国家“973”计划（2011CB710805）,国家转基因重大专项（2008ZX08012-001）

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以肺炎克雷伯氏菌（Klebsiellapneumoniae）基因组DNA为模板，应用PCR技术扩增并克隆出口晋L酸脱氢酶的基因（1dhO），将其连接到表达载体pET-22b（＋）质粒上，构建pET-22b（＋）-ldhD重组质粒，测序结果100％正确。将重组质粒pET-22b（＋）-1dhD转化到大肠杆菌表达菌株BL21（DE3）中，通过氨苄霉素抗性平板筛选，构建大肠杆菌BL21（DE3）-pET-22b（＋）-1dhD基因工程菌。重组菌株经IPTG诱导表达，SDS-PAGE蛋白电泳分析，目标条带出现在分

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