【摘 要】
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为了构建版纳微型猪近交系SRY的原核表达载体pET-32a（＋）-SRY,并通过诱导使其在大肠杆菌中获得高效表达,研究采用添加限制性内切酶位点的引物特异性扩增SRY,连入pMD19-T simple载
【机 构】
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云南农业大学,云南农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31160439）, 云南省教育厅科学研究基金项目（2010C253）, 云南农业大学动物科学技术学院科学研究基金项目（YNDKKY1005）
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为了构建版纳微型猪近交系SRY的原核表达载体pET-32a（＋）-SRY,并通过诱导使其在大肠杆菌中获得高效表达,研究采用添加限制性内切酶位点的引物特异性扩增SRY,连入pMD19-T simple载体,转化入大肠杆菌DH5α,克隆后提取pMD19-T-SRY阳性重组质粒,使用相同的内切酶同时对pMD19-T-SRY质粒和原核表达pET-32a（＋）载体进行酶切,连接后使SRY定向克隆到pET-32a（＋）表达载体中。经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌感受态DH5α,提取质粒后再次转化大肠杆
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