高产磷脂酶D菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化

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利用平板筛选法、薄层色谱(thin layer chromatogrophy,简称TLC)层析及高效液相色谱(high performance liquid chromatography,简称HPLC)定量分析,从土壤中分离得到1株具有较高磷酰基转移活性的菌株。对该菌株进行形态学观察、生理生化鉴定及16S rRNA序列分析,鉴定其为链霉菌属(Streptomyces),与李色链霉菌(Streptomyces prunicolor)同源性最高。针对该菌株的发酵培养条件进行单因素试验、Plackett-Burman试验、响应面法(response surface methodology,简称RSM)分析,最终确定菌株最佳产酶条件为可溶性淀粉15.0 g/L、牛肉膏+蛋白胨(1∶1)15.0 g/L、K2HPO42.0 g/L、Mg SO4·7H2O 0.5 g/L、初始pH值7.3、发酵温度30.5℃、发酵周期99 h;在该条件下菌株的酶活达到36.06 U/L,比原始发酵培养基提高了65.3%。
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