【摘 要】
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目的:探讨Numb基因对人膀胱癌细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法:选取人膀胱癌细胞5637为研究对象,采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照和空白对照组
【机 构】
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航天中心医院泌尿外科,解放军总医院泌尿疾病重点实验室,
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目的:探讨Numb基因对人膀胱癌细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法:选取人膀胱癌细胞5637为研究对象,采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组中Numb基因和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达;采用流式细胞技术检测各组的细胞周期;采用酶标仪检测细胞在490nm的吸光度值,评价各组细胞的增殖活力。结果:实验组Numb的△CT值为1.58±0.41,阴性对照组为5.66±0.53,空白对照组为5.81±0.47,差异有统计学意义(F=77.39,P=0.00);实验组Cyclin D1的△CT值为4.92±0.73,阴性对照组为2.59±0.33,空白对照组为2.45±0.26,差异有统计学意义(F=11.70,P=0.01)。实验组中G0/G1期细胞的比例(%)为49.76±7.07,明显高于阴性对照组的36.52±3.32和空白对照组的38.21±2.06,差异有统计学意义(F=7.17,P=0.03)。增殖实验中,实验组24 h的吸光度值为0.35±0.08,明显低于阴性对照组0.52±0.06和空白对照组0.55±0.04(F=9.03,P=0.02)。结论:Numb基因可以提高G0/G1期细胞比例,抑制膀胱癌细胞增殖,其机制可能是通过抑制Cyclin D1表达实现。
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