【摘 要】
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本研究探讨利用肠激酶加工融合蛋白的方法制备重组人白细胞介素11(rhIL-11)的工艺条件与参数。融合表达载体pET32a/IL-11在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS中诱导表达,裂解上清
【机 构】
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中国药品生物制品检定所,天津大学化工学院生物工程系
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本研究探讨利用肠激酶加工融合蛋白的方法制备重组人白细胞介素11(rhIL-11)的工艺条件与参数。融合表达载体pET32a/IL-11在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS中诱导表达,裂解上清以Ni-NTA亲和纯化,通过DsbA-EKL-(His)8的自催化切割完成单体活性肠激酶催化亚基的释放,继而对Trx-IL-11行使酶促切割作用制备rhIL-11。结果表明:亲和纯化得重组融合蛋白Trx-IL-11 11.25 mg/g湿菌,产品纯度达89.2%,回收率为91.8%。酶切体系经Ni-NTA resin充分吸附后,目标产品单体rhIL-11纯度大于95%。结论:利用肠激酶加工融合蛋白以制备rhIL-11的方法简单可行,分离纯化效果好,能够满足工业生产的需要。
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