重组人细胞色素P450 2C9在毕赤酵母中的胞内表达

来源 :中南民族大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：xzyn

【摘要】

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以含有CYP2C9基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板,并在人细胞色素P4502C9的5＇端插入kozak序列及3＇端6×His标签进行PCR扩增,克隆至真核表达载体pPIC3.5K,利用电激法将

【作者】

：

吴云华孙鹏宇

【机构】

：

中南民族大学生命科学学院

【出处】

：

中南民族大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2013年2期

【关键词】

：

人细胞色素P4502C9 毕赤酵母胞内表达

【基金项目】

：

中南民族大学中央高校基金资助项目(CZZ11004)

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以含有CYP2C9基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板,并在人细胞色素P4502C9的5＇端插入kozak序列及3＇端6×His标签进行PCR扩增,克隆至真核表达载体pPIC3.5K,利用电激法将经Sal I线性化的重组质粒pPIC3.5K-2C9转化至毕赤酵母GS115中,通过抗性、表型和PCR筛选多拷贝整合株,甲醇诱导毕赤酵母GS115/pPIC3.5K-2C9的表达,SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定表达产物.结果表明：含有重组质粒的重组pPIC3.5K-2C9

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