【摘 要】
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目的研究产CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)功能性基因片段的结构特征. 方法质粒电转移及质粒谱分析以定位CTX-M-14型基因;耐药质粒酶切基因文库(鸟枪法)技术及其计算机辅助在线分析以了解此酶功能性基因片段的分子结构特征;对Asn-104→Glu、Gly-232→Ala、Ser-237→Ala和Asp-240→Glu进行定点突变研究. 结果 CTX-M-14基因定位在85kb可
【机 构】
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510630,广州,中山大学附属第三医院呼吸内科
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目的研究产CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)功能性基因片段的结构特征. 方法质粒电转移及质粒谱分析以定位CTX-M-14型基因;耐药质粒酶切基因文库(鸟枪法)技术及其计算机辅助在线分析以了解此酶功能性基因片段的分子结构特征;对Asn-104→Glu、Gly-232→Ala、Ser-237→Ala和Asp-240→Glu进行定点突变研究. 结果 CTX-M-14基因定位在85kb可转移多重耐药的质粒上;采用鸟枪法克隆到1.8 kb、2.4 kb、3.1 kb产CTX-M-14的功能性基因片段,序列分析显示其定位在耐药质粒上转座子基因结构中;Asn-104→Glu突变可显著降低CTX-M-14型ESBLs对头孢噻肟的水解能力. 结论 CTX-M-14基因定位在耐药质粒上转座子基因结构中;Asn-104可能是CTX-M型ESBLs重要的活性位点.
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