探讨IRF3 shRNA对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激枯否细胞(Kupffer cell，KC)TLR4信号下游IRF3-IFN-β、NF-κB/p38 MAPK-TNF-α/IL-1β和IL-10分子的影响。
方法采用在体灌注分离培养大鼠原代KC，并以IRF3 shRNA腺病毒体外感染KC。细胞分4组：1组：腺病毒(–)LPS(–)；2组：腺病毒(–)LPS(＋)；3组：腺病毒(＋)LPS(–)；4组：腺病毒(＋)LPS(＋)。KC培养上清液细胞因子的分泌水平采用ELISA分析；mRNA表达采用real-time PCR检测；KC核蛋白质表达采用Western blot方法。
结果LPS刺激诱导了原代KC对IRF3 mRNA和蛋白质的表达，IRF3 shRNA腺病毒应用后，细胞对IRF3 mRNA的组成性表达及LPS刺激诱导的IRF3 mRNA和蛋白质表达均明显受抑，但对IRF3蛋白质核内组成性表达无明显影响；LPS刺激枯否细胞IFN-β mRNA表达和蛋白质分泌均升高。IRF3 shRNA应用后，抑制了上述LPS的刺激效应，但对细胞IFN-β的组成性表达和分泌无明显影响；LPS刺激诱导了细胞对前炎细胞因子TNF-α和IL-1β mRNA表达及蛋白质的分泌，IRF3 shRNA腺病毒的应用，抑制了LPS刺激诱导细胞TNF-α和IL-1β蛋白质分泌水平，但对LPS刺激细胞TNF-α和IL-1β mRNA表达以及细胞组成性TNF-α和IL-1β mRNA表达和蛋白质分泌无明显影响；LPS刺激后，细胞IL-10 mRNA表达和培养上清液IL-10蛋白质分泌均显著增加。IRF3 shRNA腺病毒的应用，促进了LPS刺激诱导KC对IL-10的转录表达和分泌，但对细胞组成性IL-10表达和分泌无明显影响；LPS刺激使核内p-p65和p-p38 MAPK蛋白水平升高，但IRF3 shRNA腺病毒应用对LPS刺激细胞上述分子表达及对细胞组成性表达均无明显影响。
结论干扰腺病毒能有效抑制LPS刺激原代枯否细胞IRF3表达及其下游信号转导；IRF3有助于促进LPS刺激KC对TNF-α和IL-1β分泌，但抑制LPS刺激后IL-10的表达；LPS诱导细胞NF-κB和p38 MAPK活化不受IRF3信号影响。