【摘 要】
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目的 通过构建脓毒症肺损伤体内及体外模型，探讨外源性白细胞介素-4（IL-4）可否减轻脓毒症急性肺损伤及其可能的调节机制。方法 细胞实验：体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,选用终浓度为1.0μg/mL的脂多糖（LPS）刺激2 h后，加入不同浓度的IL-4作用24 h, CCK-8法检测细胞活力；活性氧（ROS）测定试剂盒检测ROS的含量，Elish法检测IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平，W
【基金项目】
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宁夏自然科学基金资助项目（2020AAC03335）； 国家自然科学基金资助项目（81960360）；
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目的 通过构建脓毒症肺损伤体内及体外模型，探讨外源性白细胞介素-4（IL-4）可否减轻脓毒症急性肺损伤及其可能的调节机制。方法 细胞实验：体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,选用终浓度为1.0μg/mL的脂多糖（LPS）刺激2 h后，加入不同浓度的IL-4作用24 h, CCK-8法检测细胞活力；活性氧（ROS）测定试剂盒检测ROS的含量，Elish法检测IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平，Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达水平。小鼠实验：选用C57BL/6小鼠，随机分为空白对照组（生理盐水）、模型组（LPS）及实验组（LPS造模30 min后气管滴注IL-4）,12 h后，将3组小鼠经异氟醚诱导后处死收集血清和组织样本。使用H＆E染色法观察肺损伤，采用qRT-PCR和ELISA法检测相关基因的表达，流式细胞术检测巨噬细胞的极化情况。结果 外源性IL-4可明显改善肺损伤。体外实验表明，外源性IL-4在24 h内对MH-S细胞的活力几乎无影响；外源性IL-4能够降低MH-S细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β水平，下调NF-κB p65蛋白表达量以及减少ROS的表达（P＜0.05）。体内实验表明，外源性IL-4通过下调相关基因的表达增加了F4/80+CD206+M2样巨噬细胞，抑制了F4/80+iNOS+M1样巨噬细胞的分布（P＜0.05）。此外，外源性IL-4可以影响小鼠iNOS、TNF-α、MCP-1、IL-10的蛋白表达，同时LPS诱导的p65水平升高也被外源性IL-4所抑制。结论 外源性IL-4能够抑制促炎细胞因子的表达、减少ROS生成、降低肺组织病理评分和W/D值，对改善肺损伤有积极作用。此外，外源性IL-4可促进巨噬细胞极化，并抑制NF-κB/p65信号通路激活。
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