目的探讨多种特殊染色技术在软骨细胞中的染色规律及其应用价值。方法选取出生7 d内的C57BL/6J小鼠12只,处死后取双侧膝关节软骨行软骨细胞原代培养,并行Ⅱ型胶原免疫荧光鉴定,取5代以内的原代细胞制作细胞爬片,细胞爬片制备完成后行HE染色、番红O-固绿双染色、SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色,观察软骨细胞组织形态变化,并对几种染色方式进行比较。结果 HE染色中细胞核呈紫蓝色,细胞质呈粉红色,细胞形态结构清楚;番红O-固绿双染色中细胞核呈粉红色,细胞质呈蓝绿色,细胞形态结果较清晰;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色时,衰老软骨细胞呈绿色,未衰老细胞无着色;Ⅱ型胶原免疫组化染色时,Ⅱ型胶原呈棕黄色,细胞核呈紫蓝色。结论 HE染色和番红O-固绿双染色可以清晰分辨细胞核和细胞质等细胞结构,对单个细胞形态的显示比较清楚;SA-β半染糖苷酶半乳糖苷酶衰老染色可以显示出衰老细胞的数量及衰老的程度;Ⅱ型胶原免疫组化染色可以对Ⅱ型胶原进行定位与定量。