研究硫化氢(H2S)对低密度脂蛋白受体(LDLR)的调节作用及意义。
方法小鼠原代肝细胞分为对照组、低密度脂蛋白(LDL)组以及LDL+硫氢化钠(NaHS,H2S供体)组。LDL组及LDL+NaHS组细胞给予LDL(50 mg/L),LDL+NaHS组细胞在给予LDL处理前先予NaHS(100 μmol/L)预处理0.5 h。应用Real-time PCR和Western blot分别检测小鼠原代肝细胞LDLR mRNA和蛋白的表达。将培养的小鼠原代肝细胞分为对照组、1,1'-双十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰花青高氯酸(DiI)标记的LDL组及DiI-LDL+NaHS组。DiI-LDL组细胞予DiI-LDL(10 mg/L)孵育3 h,DiI-LDL+NaHS组细胞先予NaHS(100 μmol/L)孵育1 h,然后再加入DiI-LDL(10 mg/L)孵育3 h,采用激光共聚焦法检测小鼠原代肝细胞对DiI-LDL的摄取,应用荧光定量法分析细胞培养上清中DiI-LDL的水平。
结果与对照组相比,LDL组小鼠原代肝细胞LDLR mRNA和蛋白表达均明显降低(t=5.733,P<0.01;t=2.527,P<0.05);与LDL组相比,LDL+NaHS组小鼠原代肝细胞LDLR mRNA和蛋白表达均明显升高(t=-7.639,P<0.01;t=2.388,P<0.05)。给予细胞DiI-LDL后,可以观察到细胞对DiI-LDL的摄取,H2S供体预处理后,细胞对DiI-LDL的摄取明显增加。与对照组相比,DiI-LDL组小鼠原代肝细胞培养上清中DiI-LDL水平明显增加(t=-39.156,P<0.01);H2S供体预处理使细胞培养上清中DiI-LDL水平明显降低(t=17.202,P<0.01)。
结论H2S可上调小鼠原代肝细胞LDLR的表达。