【摘 要】
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目的 观察小干扰RNA (siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞(GH3)中垂体特异转录因子-1(Pit-1)的基因表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定经siRNA转染24 h后；Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达；用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖-
【机 构】
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221006徐州医学院附属医院神经外科,221006徐州医学院附属医院神经外科,221006徐州医学院附属医院神经外科,221006徐州医学院附属医院神经外科,221006徐州医学院附属医院肿瘤科,华
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目的 观察小干扰RNA (siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞(GH3)中垂体特异转录因子-1(Pit-1)的基因表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定经siRNA转染24 h后；Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达；用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化.结果 siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA的表达水平,分别降低58.18％和75.82％；CCK-8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组；流式细胞仪分析显示,siRNA组细胞凋亡率[(9.250 00±0.996 95)％]较阴性对照组[(2.893 30±0.665 16)％]增加；,siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数[(92.91±53.25)个],与阴性对照组[(7.50±7.95)个]比较侵袭力明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Pit-1 siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡,降低侵袭力。
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目的 检测Med-19基因mRNA和蛋白在膀胱癌组织中的表达,探讨其与膀胱癌生物学行为之间的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot技术检测64例膀胱癌组织、20例正常膀胱黏膜组织中Med-19基因的表达,并结合临床资料进行分析.结果 膀胱癌组织中Med-19基因mRNA和蛋白的表达水平显著高于正常膀胱黏膜组织(P＜0.01)；其表达水平与肿瘤的直径、临床分
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经纤维支气管镜肺减容术(BLVR)是通过纤维支气管镜技术,造成靶区肺组织的萎缩,达到肺容积减少的目的,且能成功降低外科肺减容术的麻醉和围手术期风险[1-2].本研究旨在探讨经纤维支气管镜射频置管气道旁路肺减容术在绵羊肺气肿模型的应用.一、材料和方法1.肺气肿动物模型的建立:雌性健康6月龄绵羊16只,体质量20 ～ 30 kg,随机分为A、B两组.用木瓜蛋白酶建立肺气肿模型。
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