【摘 要】
：
设计表达了4个锌指核酸酶,用于切断人基因组中的rRNA基因家族的内部转录间隔序列,造成双链断裂,以此提高针对多位点基因打靶的效率,为后续基因打靶应用于基因治疗研究奠定基
【机 构】
：
佛山大学医学院; 暨南大学生命科学与技术学院; 华南农业大学动物科学学院;
【基金项目】
：
国家自然科学基金(30671194);广东省科技攻关计划(2006B20101012)资助项目
论文部分内容阅读
设计表达了4个锌指核酸酶,用于切断人基因组中的rRNA基因家族的内部转录间隔序列,造成双链断裂,以此提高针对多位点基因打靶的效率,为后续基因打靶应用于基因治疗研究奠定基础。首先,在人rRNA基因家族ITS1序列中找到2个合适的9 bp长的序列(中间间隔6bp)为锌指蛋白识别位点,根据识别位点序列每个位点分别设计2个三锌指蛋白。通过设计引物进行重叠延伸PCR得到全长编码锌指蛋白的DNA,分别克隆到表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET28a-ZFP,转化大肠杆菌RossettaTM(DE3),实现带组氨酸标签的锌指融合蛋白的表达与纯化。同时,将限制性内切酶FokI的切割结构域分别与4个锌指蛋白序列采用PCR拼接后克隆到表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET28a-ZFN,转化到大肠杆菌RossettaTM(DE3),实现带组氨酸标签的锌指核酸酶融合蛋白的表达并纯化。
其他文献
书法艺术与中国汉字相生相伴,书法曾作为我国知识分子的启蒙教育倍受重视。然而,随着信息技术的发展,书法艺术培养与教育在语文教学中逐渐被边缘化。为了传承中华悠久的书法
本文仅从北京市朝阳区档案馆按照国家档案局每四年对归档光盘进行一次数据迁移的要求,对馆藏光盘档案重新分类编号、迁移数据并多套备份的工作实践出发,从工作流程的角度分析
为了达到使学生扩充知识、加强能力、提高素质,培养高层次临床医学人才的目的,我们对七年制临床医学专业生理学教学,从加强素质教育入手,在教学内容、教学方法等方面行了较大
在弱酸性Tris-盐酸介质中,赖诺普利与维多利亚蓝B反应生成具有2个正吸收峰的二元离子缔合物,它们的吸收峰分别位于518 nm和660 nm,表观摩尔吸光系数（κ）分别为7.19×104和6.99
针对已经定型的某纯电动车项目高压系统遇到的高SOC、且大扭矩起步时,发生动力电池单体过压报警的问题,从理论上分析讨论了产生问题的原因,并提出了一种通过软件改变开关频率
在镁合金铸造工艺特性的基础上，介绍了我国镁合金熔铸技术与装备生产研发现状和最新进展。
当前,我国农村地区的人口老龄化问题日益严重。在未来一段时间内,家庭养老依旧是农村养老的主要力量。伴随着社会结构和家庭结构的变迁,农村家庭养老问题逐步指向传统社会养老的非制度性主体—女儿,女儿养老的工具性意义得以提升。但家庭养老实践中的性别差异一直存在,女儿尚未成为和儿子一样的平等的养老主体,仍旧面临着各种正式和非正式的制度障碍。因此,研究女儿养老制度障碍的解决之道,对于推动女儿养老的发展,推进新的
目的本课题通过对治疗前后各项指标的对比,客观评价耳穴埋豆结合生物反馈疗法治疗脾肺气虚型FDD的可行性、有效性及临床优势,探寻FDD的辨证治疗新途径。方法选择2017年12月至2018年12月就诊于安徽省中医院肛肠科门诊及住院符合标准的脾肺气虚型FDD患者60例,按照随机数表法分成生物反馈组及综合治疗组各30例。综合治疗组30例予耳穴埋豆联合生物反馈治疗,生物反馈组30例予单纯生物反馈治疗,两组患者
在人类建筑历史的发展中，权力对建筑的影响随处可见，建筑从某一方面反映了权力的意志。俄罗斯历史学院Ｄ．Ｏ．什维德科夫斯基院士分析了苏联时的领导人对建筑的态度，以及苏联建筑在发展
一、数字化档案信息存储体系随着社会信息化程度的不断提高，各级档案馆也将逐步成为海量数字化档案信息的存储中心。建设安全、可用的数字化档案信息存储体系将成为现代档案馆