鹿茸中氨基酸含量的测定

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  摘要:鹿茸多在夏、秋两季锯取,经加工后阴干或烘干,鹿茸片就是鹿茸进行切片加工成为鹿茸切片的,鹿茸多为梅花鹿或马鹿还没有骨化的幼角。鹿茸具有“生精补髓,养血益阳,益气强智,强筋壮骨”的功效。现代医学认为具有“抗疲劳、衰老及镇静等”。鹿茸中含有多种氨基酸,可以提高人体免疫力,促进造血功能。
  中图分类号:Q517
  1、实验材料
  根据NY/T1162—2006标准中的规定,鹿茸片分为梅花鹿茸片和马鹿茸片,每种鹿茸片又分别分为蜡片、粉片、纱片、骨片四类。现从西丰某鹿茸经销商获取的马鹿茸的纱片和骨片为原料。
  2、仪器和设备
  德国SYKAM的S-433D型氨基酸自动分析仪、真空汞、恒温干燥箱。
  3、试剂
  17种氨基酸标准品
  6mol/L的盐酸:取36-38%优级纯盐酸500mL,定容到1000mL,加0.1%苯酚。
  4、样品的制备
  4.1、称样:称取含蛋白7.5-25mg的样品,精确到0.1mg。用粉碎机粉碎,并过60目筛,充分混匀后放入水解管中备用。
  4.2、水解:
  根据氨基酸种类的不同,将处理方法分为:常规酸水解、氧化酸水解、碱水解法。
  常规酸水解过程中,含硫氨基酸(胱氨酸、蛋氨酸)部分被破坏,色氨酸完全被破坏。因此依据NY/T 1618-2008中的规定,胱氨酸、蛋氨酸应用氧化酸水解法来处理,其它15种氨基酸用常规水解法。
  (1)常规水解法:
  在水解管内加入10mL浓度为6mol/L的盐酸,将水解管放入冷冻剂中冷冻,(注:使1/3到1/2的液体结冰)。充高纯氮气1min~2min,盖好塞,将水解管置于110度恒温干燥箱中保温24小时后(注:不要摇动)。取出冷却至室温,开管后过滤。吸取适量的滤液于60℃以下浓缩至干,最后加入适量样品稀释液震荡使氨基酸溶解。用一次性注射器吸取混匀后的样品,用针头过滤器过滤至进样瓶中上机测定。
  (2)氧化酸水解法:
  将2mL预冷的过甲酸溶液加入到称好的试样中,在2℃冰箱中放置15小时,或55℃水浴中15分钟,溶液中多余的过甲酸可以通过加入氢溴酸来除去。(以下步骤同常规水解法,接“将水解管置于110度恒温干燥箱中保温24小时……。”)
  5、仪器条件:
  茚三酮:流速0.01mL/min
  汞压:S2100 35-37.0bar
  S4300 3-5.0bar
  6、结果与讨论
  6.1、实验结果
  两种鹿茸片中氨基酸的种类及测定结果见表1
  6.2、从测定的结果中可看出
  两种鹿茸片虽档次不同,但均富含多种氨基酸,尤其以甘氨酸质量分数最高,谷氨酸、精氨酸和脯氨酸质量分数也很高;各种氨基酸的总质量分数平均达到46.2%,其中必需氨基酸质量分数平均值为11.7%。
  纱片是选择鹿茸中下段切成薄片而成骨片;骨片是用最近骨端的鹿茸段切成,质量比纱片为差。标准NY/T1162—2006中规定纱片的氨基酸含量不小于42.5%,而骨片的氨基酸含量不小于39.0%。从表1的数据中可以證明以上的两种说法。
  结果表明:在选购和使用鹿茸片时可参照鹿茸相关资料或标准。本次实验也为其提供了科学理论依据。
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