【摘 要】
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为了检测培养的蒙古绵羊输卵管上皮细胞内sBD-1 mRNA表达水平,运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行了相对定量测定。首先,建立蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养体系作为体外
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特职业学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30460093)
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为了检测培养的蒙古绵羊输卵管上皮细胞内sBD-1 mRNA表达水平,运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行了相对定量测定。首先,建立蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养体系作为体外试验模型,提取细胞总RNA,根据GenBank中羊β-防御素基因序列,设计合成引物,进行实时荧光定量PCR。以β-Actin基因为内参基因,对sBD-1 mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算sBD-1 mRNA的相对表达量。经测序分析,扩增产物为β-防御素。结果显示,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术
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