猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：winqstrong

【摘要】

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本试验利用PCR技术，扩增得到猪瘟病毒（CSFV）C株E2基因的主要抗原片段A／D区549bp，将其酶切纯化后，与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接，转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板

【作者】

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郑仲华李东升姚俊庸常艳勾红潮刘文俊赵明秋毛晶丹

【机构】

：

华南农业大学兽医学院

【出处】

：

中国畜牧兽医

【发表日期】

：

2014年5期

【关键词】

：

猪瘟病毒C株 A D主要抗原区截短表达 classical swine fever virus （CSFV） C strain A/D antigen do

【基金项目】

：

基金项目：公益性行业（农业）科研专项（201203056）,国家基金面上项目（31172321）,广东省高等学校科技创新（重点）项目（2012CXZD0013）.

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本试验利用PCR技术，扩增得到猪瘟病毒（CSFV）C株E2基因的主要抗原片段A／D区549bp，将其酶切纯化后，与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接，转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR，挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板，挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE，在约39ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后，分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Westernblot

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