热敏肠毒素促进产肠毒素大肠杆菌对小肠上皮细胞系IPEC-J2的黏附的初步研究

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chloexg

【摘要】

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本试验利用PCR技术,以K88ac标准株C83902基因组DNA为模板扩增出热敏肠毒素（heat-labile toxins,LT）基因,大小约1.1 kb。将其克隆入表达质粒载体pACYC184,构建和筛选出含正确插

【作者】

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郁磊吴娟朱国强

【机构】

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扬州大学兽医学院,南京农业大学动物医学院,南京天邦生物科技有限公司

【出处】

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中国动物传染病学报

【发表日期】

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2012年6期

【关键词】

：

热敏肠毒素黏附 IPEC-J2 K88ac E.coli heat-labile toxin bacterial adherence porcine s

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30571374 30771603 31072136 31270171）, 江苏省属高校自然科学重大基础研究项目（08KJA230002）, 江苏高校优势学科建设工程资助项目, 教育部创新团队, 科技部转基因生物新品种培育重大专项（2009ZX08006-004B）

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本试验利用PCR技术,以K88ac标准株C83902基因组DNA为模板扩增出热敏肠毒素（heat-labile toxins,LT）基因,大小约1.1 kb。将其克隆入表达质粒载体pACYC184,构建和筛选出含正确插入LT基因的pACYC-LT重组质粒。采用同样方法,构建和筛选出两种含点突变LT基因的重组质粒（pACYC-LT72和pACYC-LT192）。进一步将上述重组质粒DNA转化入不表达任何毒素的大肠杆菌SE5000株。GM1-ELISA结果表明,上述重组菌均能在体外正常表达LT毒素蛋白。以猪小

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