【摘 要】
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目的:从猪肾中提取碱性磷酸酶(ALP),并对其能否作为参考品进行研究. 方法:从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜,用正丁醇溶解膜结合的酶,经硫酸铵沉淀,DEAE-Sephacel、ConA-Sepha
【机 构】
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南京大学医学院临床学院,南京军区南京总医院
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目的:从猪肾中提取碱性磷酸酶(ALP),并对其能否作为参考品进行研究. 方法:从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜,用正丁醇溶解膜结合的酶,经硫酸铵沉淀,DEAE-Sephacel、ConA-Sepharose、Sephadex G-200及抗γ-谷酰基转移酶(GGT)免疫亲和层析提纯ALP. 结果:提纯的ALP比活达402 kU/g蛋白,几乎不含杂酶(未检出ALT、AST、ChE、AMY、CK、LDH,GGT仅含2 U/780 U ALP).其对底物4-硝基磷酸酚(4-NPP)的Km值为1.35 mmol/L
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