利用FPLC技术建立重组碱性蛋白酶的快速纯化方案

来源 :食品与发酵工业 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tt24834051

【摘要】

：

在构建了以地衣芽孢杆菌为宿主的产碱性蛋白酶的工程菌BA071以后,为了给探索重组酶的性质及其稳定性奠定基础,利用快速蛋白液相层析(FPLC)技术,建立了快速高效纯化碱性蛋白酶

【作者】

：

唐雪明沈微邵蔚蓝王正祥方惠英诸葛健

【机构】

：

江南大学教育部工业生物技术重点实验室,无锡,214036

【出处】

：

食品与发酵工业

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

碱性蛋白酶基因工程菌快速蛋白液相层析分离纯化

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在构建了以地衣芽孢杆菌为宿主的产碱性蛋白酶的工程菌BA071以后,为了给探索重组酶的性质及其稳定性奠定基础,利用快速蛋白液相层析(FPLC)技术,建立了快速高效纯化碱性蛋白酶的方案.发酵液通过硫酸氨沉淀、DEAE-A-50脱色及聚乙二醇浓缩得粗酶,再经过CM-Sephadex-C-50、Sephadex-G-75柱层析后较好地得到了单一组份的重组碱性蛋白酶,酶纯度提高了76.2倍.SDS-PAGE显示重组碱性蛋白酶分子质量为28·#ku.

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