【摘 要】
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实验于2005-10/2006-06在江苏省干细胞重点实验室进行。体外分离培养新生SD大鼠心室肌细胞2周后,Trizol法抽提细胞总RNA,RT-PCR获得心肌营养素1基因,与克隆载体PMD18-T-Vecto
【机 构】
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苏州大学医学生物技术研究所（江苏省干细胞重点实验室）,无锡市第一人民医院心内科
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实验于2005-10/2006-06在江苏省干细胞重点实验室进行。体外分离培养新生SD大鼠心室肌细胞2周后,Trizol法抽提细胞总RNA,RT-PCR获得心肌营养素1基因,与克隆载体PMD18-T-Vector连接,转化TOP10感受态细菌,阳性克隆经鉴定正确后,PCR扩增心肌营养素1基因,EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,T4DNA连接酶连接,构建pEGZ-CT-1的反转录病毒载体。经PCR及酶切鉴定,测序表明心肌营养素1基因成功插入pEGZ-Term载体。pEGZ-CT-1载体的构建,为转基因细胞的制备
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