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目的 探讨miR-21-5p对1型辅助性T细胞（Th1细胞）极化相关信号通路的调控作用。方法 提取小鼠脾脏单个核细胞，通过免疫磁珠阴性分选试剂盒分离初始（na?ve）CD4+T细胞，使用抗小鼠CD3ε单克隆抗体、抗小鼠CD28单克隆抗体、抗小鼠白细胞介素4（IL-4）单克隆抗体、小鼠IL-12和小鼠IL-2混合因子诱导体系诱导na?ve CD4+T细胞向Th1细胞极化，同时转染miR-21-5p模拟物或模拟物对照，处理72 h后经流式细胞术分别检测Th1正常诱导组、模拟物对照组和miR-21-5p模拟物组CD4+和干扰素γ（IFN-γ）+双阳细胞百分比；采用实时荧光定量PCR检测Th1细胞极化相关关键转录因子和细胞因子mRNA表达水平；Western印迹法检测Th1细胞极化相关通路的关键蛋白及其磷酸化水平；结合双荧光素酶报告系统验证miR-21-5p调控其作用靶标IFN-γ、IL-12受体β1（IL-12Rβ1）和信号转录子和转录激活子1（STAT1）的表达。结果 经免疫磁珠分选获得高表达CD62L的na?ve CD4+T细胞；与Th1正常诱导组和模拟物对照组相比，miR-21-5p模拟物转染组CD4+IFN-γ+双阳细胞百分比显著降低（P＜0.01）;Th1细胞极化相关JAK-STAT信号通路的关键转录因子STAT1（P＜0.01）、STAT4（P＜0.05）和T盒21转录因子（T-bet）（P＜0.01）表达显著下调，且关键细胞因子IFN-γ（P＜0.01）和信号通路受体IL-12Rβ1（P＜0.05）mRNA表达水平也显著下调，同时STAT1和STAT4蛋白磷酸化水平亦显著降低；结合双荧光素酶报告系统证实，miR-21-5p模拟物可分别特异性靶向结合IFN-γ（P＜0.01）,IL-12Rβ1（P＜0.01）和STAT1（P＜0.05）基因的3′-非翻译区，而对应靶向位点突变后则不影响其表达。结论 miR-21-5p可靶向下调IFN-γ，IL-12Rβ1和STAT1表达，抑制IL-12和IFN-γ介导的JAK-STAT信号通路活化，从而抑制Th1细胞极化。