【摘 要】
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目的建立生物素标记探针-液相杂交-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测非编码小RNA（sRNA）的方法。方法将生物素标记的sRNAU6寡核苷酸探针经非变性PAGE电泳后转印至尼龙膜上,然后
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,浙江省医学遗传学重点实验室/检验医学省部共建教育部重点实验室/温州医学院检验医学院与生命科学学院
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目的建立生物素标记探针-液相杂交-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测非编码小RNA（sRNA）的方法。方法将生物素标记的sRNAU6寡核苷酸探针经非变性PAGE电泳后转印至尼龙膜上,然后用辣根过氧化物酶（HRP）耦联链霉亲和素进行检测。从细胞中提取总RNA,用已标记U6探针优化液相杂交退火条件及杂交缓冲液;用建立的方法检测并计算BEAS-2B、A549细胞中sRNAU6与miRNA145的含量。结果将Biotin-11-dUTP成功标记至寡核苷酸上,随着寡核苷酸浓度增加,检测信号强度越强,10μmo
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