【摘 要】
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目的运用免疫学方法筛选日本血吸虫(中国大陆株)童虫cDNA文库,寻找血吸虫新基因,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Mago nashi样蛋白基因.方法用混合的血吸虫感染者血清
【基金项目】
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国家自然科学基金;安徽省自然科学基金
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目的运用免疫学方法筛选日本血吸虫(中国大陆株)童虫cDNA文库,寻找血吸虫新基因,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Mago nashi样蛋白基因.方法用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,随机挑取阳性重组克隆进行测序,以获得血吸虫基因,并通过BLAST程序进行比较及同源性分析,根据分析结果设计合成引物,用PCR法扩增出日本血吸虫Mago nashi样蛋白基因(SiM)编码序列,将其克隆入pGEM-T载体和pBK CMV载体,用双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定.结果本研究共挑取7个阳性克隆,通过测序获得了5个有表达序列标签(Expressed Sequence Tag.EST)价值的序列,并进行了同源性分析;用PCR法扩增出大小为441bp SjM开放阅读框,重组质粒pGEM-SjM和pBK CMV-SjM经双酶切均可获得一条为PCR产物一致的DNA片段.结论本实验获得了5个有EST价值的序列,并成功地克隆了其中SjM编码基因.
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