【摘 要】
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目的 筛选干扰Apollon基因表达的siRNA序列并鉴定其功能.方法 采用化学方法合成针对Apollon基因不同位点的siRNA序列;应用Lipofectamine 2000转染人类乳腺癌MCF-7细胞;反转录PCR(RT-PCR)检测Apollon mRNA表达水平;细胞免疫荧光结合激光共聚焦技术定量分析Apollon蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测siRNA干扰Apo
【机 构】
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目的 筛选干扰Apollon基因表达的siRNA序列并鉴定其功能.方法 采用化学方法合成针对Apollon基因不同位点的siRNA序列;应用Lipofectamine 2000转染人类乳腺癌MCF-7细胞;反转录PCR(RT-PCR)检测Apollon mRNA表达水平;细胞免疫荧光结合激光共聚焦技术定量分析Apollon蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测siRNA干扰Apollon后对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响.结果 合成的3对siRNA序列均能抑制Apollon mRNA表达,其siRNA1、siRNA2、siRNA3对ApollonmRNA的抑制率分别为(36.201±11.629)％、(67.308±7.686)％、(47.123±12.000)％,与对照组相比差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);siRNA2转染MCF-7细胞后Apollon蛋白的荧光强度为(14.97±2.08)％,增殖抑制率达(73.361±2.118)％,凋亡率为(28.793±0.743)％.结论 筛选出的siRNA2序列可有效沉默Apollon基因的表达,显著抑制MCF-7细胞的增殖和促进其凋亡,为肿瘤靶向治疗提供实验依据。
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